一步法分离石蜡切片DNA的改进与鉴定

• 作者: 彭剑桥 朱敏 杨秦 雷平
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA分离 石蜡包埋组织切片 线粒体DNA 核基因
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 698-702
• 页数: 5页
• 分类号: R446
• 字数: 3488字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.06.027

摘要

目的：改进一种以含蛋白酶K的裂解液作用于石蜡包埋处理的细胞、分离DNA粗提液用于PCR扩增的实验方案。方法石蜡包埋组织切片经常规脱蜡处理,用蛋白酶K裂解液洗脱细胞,55℃消化3 h后离心,吸取上清液；分光光度法检测DNA酶裂解液质量和浓度；以之为模板分别扩增人线粒体基因微卫星多态D310区、ATPase6基因区和核基因HBB、BRCA1等的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳检测分析PCR扩增情况,并测序验证扩增产物。结果以石蜡切片的DNA裂解粗提液为模板,扩增目的DNA片段阳性率可达100%；获得序列分析验证。结论改进的蛋白酶K裂解液一步洗脱消化法操作简单、过程快捷、费用低廉,能快速有效地分离石蜡组织切片DNA,用于后续PCR扩增检测,具有较高效率。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱敏	中南大学生命科学学院分子生物学研究中心	22	85	4.0	9.0
2	彭剑桥	湖南省人民医院检验科	9	33	3.0	5.0
3	雷平	湖南省人民医院临床输血科	6	18	3.0	4.0
4	杨秦	中南大学生命科学学院分子生物学研究中心	3	1	1.0	1.0