胸膜肺炎放线杆菌抗体ApxⅣ-Dot-PPA-ELISA检测方法的建立

• 作者: 伍锐 姜宏泽 张俊 文心田 文翼平 曹三杰 李英 杨瑞晨 黄小波
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ 表达 Dot-PPA-ELISA
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 633-638
• 页数: 6页
• 分类号: S852.619
• 语种: 中文

摘要

本研究构建了胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素ⅣA(ApxⅣA)的原核表达质粒pET-28a(+)-Apx Ⅳ,并在大肠杆菌BL21 (DE3)中成功表达出分子质量约为48 ku的ApxⅣ蛋白,经Western-blot分析表明该重组ApxⅣ蛋白具有反应原性.试验进一步用纯化的重组ApxⅣ蛋白作为抗原,建立了胸膜肺炎放线杆菌抗体的Dot-PPA-ELISA检测方法,该方法诊断膜片上点样ApxⅣ抗原质量为0.737 μg,该方法检测灵敏度高,可检测到胸膜肺炎放线杆菌标准阳性血清IgG的最低含量为8.374×10-9g;检测特异性好,不与副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、猪链球菌2型、多杀性巴氏杆菌、日本脑炎病毒的阳性血清发生交叉反应.应用建立的诊断方法对446份临床血清样品进行检测,胸膜肺炎放线杆菌抗体的阳性检出率为25.37％.结果表明,该方法具有操作方便、灵敏、结果易于判读等优点,可应用于猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文心田		100	612	14.0	19.0
2	曹三杰		89	524	12.0	17.0
3	张俊		5	23	2.0	4.0
4	黄小波		52	188	9.0	11.0
5	李英		8	38	3.0	6.0
6	伍锐		13	6	1.0	2.0
7	文翼平		16	32	3.0	5.0
8	姜宏泽		1	0	0.0	0.0
9	杨瑞晨		1	0	0.0	0.0