猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立

• 作者: 何启盖 刘军发 刘建杰 吴斌 唐先春 徐晓娟 贝为成 陈焕春
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌 apxICA基因 克隆 原核表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 148-151
• 页数: 4页
• 分类号: S828
• 字数: 3789字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2004.01.024

摘要

根据胸膜肺炎放线杆菌S4074菌株毒素Ⅰ的序列,设计了1对引物,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ的结构基因(aoxICA),扩增的DNA片段大小为3 640 bp(4 687～8 326 bp),将其克隆到pMD18-T载体中,酶切鉴定和序列测定后,进一步将其插入pET-28a中构建了原核表达载体,SDS-PAGE和Westernblotting分析表明,该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了表达,而且表达的蛋白质具有免疫学活性.利用表达的蛋白作为抗原包被酶标板,建立了检测毒素Ⅰ血清抗体的ELISA方法.临床应用表明,该方法可用于APP强毒株感染的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐晓娟	华中农业大学动物医学院动物病毒室	23	359	11.0	18.0
2	陈焕春	华中农业大学动物医学院动物病毒室	331	4866	36.0	53.0
3	刘军发	华中农业大学动物医学院动物病毒室	7	359	7.0	7.0
4	何启盖	华中农业大学动物医学院动物病毒室	170	2510	25.0	42.0
5	吴斌	华中农业大学动物医学院动物病毒室	104	1687	21.0	36.0
6	刘建杰	华中农业大学动物医学院动物病毒室	13	379	9.0	13.0
7	唐先春	华中农业大学动物医学院动物病毒室	7	175	6.0	7.0