猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ部分基因片段的体外表达与初步应用

• 作者: 何孔旺 彭小华 陆承平
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 胸膜肺炎放线杆菌 毒素Ⅳ 表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 608-611
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 2851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.05.013

摘要

参照GenBank中的猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae,App)血清1和3型菌株序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增毒素Ⅳ(ApxⅣ)基因3'端1 096bp的目的片段,然后克隆到pMD18-T载体中,转入大肠杆菌(Es-cherichia coli)的宿主菌DH5a中,提取阳性克隆质粒进行双酶切和测序鉴定,将T-载体中切下目的片段定向克隆到pET32a(+)中,转入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约60 kD的蛋白,免疫转印鉴定呈阳性,ApxⅣ基因体外成功表达.以纯化的表达产物包被ELISA板,初步检测了一些血清样品,结果预示表达的蛋白可用于区分灭活疫苗免疫和野毒感染.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何孔旺	江苏省农科院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室	101	1368	22.0	33.0
2	陆承平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	387	5495	37.0	51.0
3	彭小华	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	2	16	2.0	2.0