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摘要:
目的:对人血浆凝血因子Ⅷ( coagulation factor Ⅷ,FⅧ)制备过程中4种柱纯化前处理方法进行比较并分析其优缺点,为血源FⅧ的纯化制备提供借鉴与参考。方法冷沉淀经Tris溶解后的上清,分别用甘氨酸沉淀法、PEG沉淀法、酸沉淀法和氢氧化铝凝胶吸附法处理;用活化部分凝血活酶( APTT)法测定样品上清中FⅧ活性,计算总活性回收率和样品的比活性,用非还原性SDS-PAGE电泳比较去除杂蛋白的效果。结果4种处理方法中,甘氨酸沉淀法总活性回收率最高[(94.00±7.60)%],其次是酸性沉淀法[(89.47±2.60)%]、PEG沉淀法[(80.92±9.67)%],氢氧化铝吸附法的总活性回收率最低[(78.65±7.52)%];甘氨酸沉淀法与PEG沉淀法去除杂蛋白的效果优于酸性沉淀法和氢氧化铝吸附法;经4种不同方法处理后,甘氨酸沉淀法所得样品中 FⅧ比活最高[(0.6856±0.1258)IU/mg],其次是PEG沉淀法[(0.5773±0.0787)IU/mg]、酸性沉淀法[(0.3885±0.0301)IU/mg],氢氧化铝吸附法所得样品比活最低[(0.2879±0.0472)IU/mg]。结论在上述方法中,甘氨酸沉淀法和PEG沉淀法的总体效果较佳,且因后者操作更加简便、快捷,在实际生产过程中采用PEG沉淀法较为合适。
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文献信息
篇名 人血浆凝血因子Ⅷ柱纯化前处理方法的比较
来源期刊 军事医学 学科 医学
关键词 人凝血因子Ⅷ 冷沉淀 柱纯化前处理
年,卷(期) 2015,(3) 所属期刊栏目 血液制品
研究方向 页码范围 199-202
页数 4页 分类号 R973|R392-33
字数 3194字 语种 中文
DOI 10.7644/j.issn.1674-9960.2015.03.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 吕茂民 军事医学科学院野战输血研究所 56 376 11.0 16.0
2 章金刚 军事医学科学院野战输血研究所 124 845 15.0 21.0
3 余蓉 四川大学华西药学院微生物与生化药学教研室 139 479 11.0 15.0
4 赵雄 军事医学科学院野战输血研究所 22 197 9.0 13.0
5 王方 四川大学华西药学院微生物与生化药学教研室 6 9 2.0 3.0
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人凝血因子Ⅷ
冷沉淀
柱纯化前处理
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北京太平路27号
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