gp10基因的原核表达及其联合异烟肼的体外抗结核菌活性

• 作者: 冯燕梅 彭丽 彭蔚 黎友伦
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: gp10蛋白 异烟肼 结核杆菌 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 548-552,封3
• 页数: 6页
• 分类号: R378|R346
• 字数: 3753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20150322

摘要

目的:原核表达分枝杆菌噬菌体D29内溶素gp10蛋白,检测其单用及与异烟肼联合对体外结核菌的抗菌活性.方法:采用PCR法从分枝杆菌噬菌体D29基因组中扩增gp10基因,克隆至原核表达载体pET32a(+),经双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中表达目的蛋白.采用微量刃天青显色法测定gp10蛋白对结核分枝杆菌(MTB)标准株H37 Rv和临床分离耐多药株的最低抑菌浓度(MIC),同时观察其与异烟肼联用对H37 Rv的部分抑菌浓度指数(FICI).结果:PCR扩增获得长1 479 bp的gp10基因,重组质粒pET32a(+)-gp10经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切获得长约5 900和1 479 bp的条带,gp10基因测序结果与GenBank中基因序列一致,并表达相对分子质量约75 200的目的蛋白.重组蛋白gp10对MTBH37 Rv和临床分离耐多药株的MIC为256mg·L-1,其与异烟肼联用对H37Rv的FICI为0.5.结论:成功表达重组蛋白gp10,gp10对体外MTB H37Rv和临床耐多药株均表现出良好抗菌活性,其与异烟肼联用对体外H37Rv表现出协同效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭丽	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	63	384	10.0	16.0
2	黎友伦	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	67	377	10.0	16.0
3	冯燕梅	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	20	36	3.0	4.0
4	彭蔚	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	2	4	1.0	2.0