双重PCR检测板栗疫病菌的研究

• 作者: 张静 朱天辉 郑磊 麻文建
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 板栗疫病菌 分子检测 双重PCR ITS SCAR标记
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 7-13
• 页数: 7页
• 分类号: S763
• 字数: 6576字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.2015.05.002

摘要

由板栗疫病菌( Cyphonectria parasitica)引起的板栗疫病是板栗栽培区的主要病害,也是全国林业危险性有害生物. 为建立C. parasitica的快速分子检测技术,根据C. parasitica与GenBank中同属其他物种的ITS序列差异设计了引物 CP1/CP2,扩增了大小为 285 bp 的目的片段. 进一步用 RAPD 技术从供试菌株中标记出C. parasitica的特异性片段,通过对RAPD特异片段克隆、测序后设计引物SC1/SC2,扩增的目的片段大小为389 bp,实现了RAPD标记向SCAR标记的成功转化. 采用引物对组合方式将引物CP1/CP2和SC1/SC2组成双重PCR,优化PCR反应条件并检测引物的特异性和灵敏度. 双重PCR能从C. parasitica扩增出285 bp和389 bp的两条特异条带,而其他供试菌株及阴性对照均无条带,检测灵敏度达到300 fg/μL的基因组DNA. 利用双重PCR能成功检测出自然条件下已发病板栗及处于潜伏期病害中的C. parasitica.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱天辉	四川农业大学林学院	167	1369	19.0	26.0
2	张静	四川农业大学林学院	46	354	11.0	17.0
3	郑磊	四川农业大学林学院	10	39	4.0	5.0
4	麻文建	四川农业大学林学院	9	18	3.0	3.0