环介导恒温扩增技术快速检测鼠疫耶尔森菌

• 作者: 冯娜 周亚洲 周育森 杨瑞馥 毕玉晶 汪琼 王效义 范艳晓 韩延平
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 鼠疫耶尔森菌 环介导恒温扩增技术 检测
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 868-872
• 页数: 5页
• 分类号: R378.61
• 字数: 4595字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2015.11.014

摘要

目的：建立简单、快速环介导恒温扩增技术（LAMP）检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a 设计引物；应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测；通过对鼠疫菌和其他近源菌同时进行检测评价方法的特异性；通过对不同稀释浓度的鼠疫菌 DNA 模板进行 LAMP 和 PCR 检测以确定方法的灵敏度。结果用建立的 LAMP 法对与鼠疫菌近源30种其他菌株进行扩增，结果均为阴性，该方法具有很高的特异性。LAMP 法检测鼠疫菌 DNA 的灵敏度可达到20 pg，比常规 PCR 法高10倍。检测反应在25 min 以内完成。结论该方法具有快速、灵敏、特异、操作简单的特点，有望发展成为现场快速检测鼠疫菌的有效手段。