荧光定量PCR快速检测鼠疫耶尔森氏菌的实验研究

• 作者: 周冬生 张玲 杨瑞馥 毕玉晶 王津 翟俊辉 郭兆彪
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼠疫耶尔森氏菌 荧光定量PCR,标识序列,LightCycler
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 206-209
• 页数: 4页
• 分类号: R378.6
• 字数: 3769字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.03.004

摘要

目的利用LightCycler建立一种简便、特异的荧光定量PCR检测方法,用于鼠疫耶尔森氏菌的快速检测.方法采用SYBR Green I随机掺入法,以Roche 试剂盒为标准,比较两公司的DNA聚合酶,用鼠疫菌31004建立荧光PCR反应体系;针对鼠疫耶尔森氏菌特异的染色体标识序列和质粒上F1抗原基因设计引物,检测其灵敏度和特异性,以盲测试验进行验证;在此基础上鉴定275株鼠疫耶尔森氏菌,并测试该法检测脏器污染模拟标本的灵敏度.结果建立以一个公司试剂为主较低成本的PCR反应体系;EV76的检测灵敏度可达每反应体系1.6个菌;检测我国18个生态型共计275株鼠疫耶尔森氏菌及28株非鼠疫菌株的PCR扩增结果表明,鼠疫菌株均出现特异的扩增结果,28株对照菌株均为阴性;肝、脾、肺模拟标本检测灵敏度可达每反应体系4 000个菌.结论该方法对于检测鼠疫耶尔森氏菌具有简便、快捷、高敏感性和特异性的特点,适用于鼠疫紧急疫情时的快速诊断和疫源地监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟俊辉	军事医学科学院微生物流行病研究所	27	568	14.0	23.0
2	杨瑞馥	军事医学科学院微生物流行病研究所	180	1706	21.0	33.0
3	张玲	军事医学科学院微生物流行病研究所	7	131	4.0	7.0
4	周冬生	军事医学科学院微生物流行病研究所	36	288	10.0	15.0
5	郭兆彪	军事医学科学院微生物流行病研究所	47	474	13.0	20.0
6	王津	军事医学科学院微生物流行病研究所	30	378	11.0	18.0
7	毕玉晶	军事医学科学院微生物流行病研究所	4	28	2.0	4.0