药用植物胡萝卜悬浮细胞系的建立及其相关转基因研究

• 作者: 应栩华 汪一帆 王刚 陈观平
• 来源期刊: 中华中医药学刊
• 学科: 医学
• 关键词: 药用植物 胡萝卜 悬浮细胞 次生代谢产物 转基因
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 省级项目平台
• 页码范围: 186-188,后插18-后插19
• 页数: 1页
• 分类号: R931.71|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2015.01.056

摘要

目的:建立药用植物悬浮细胞系,筛选稳定合成次生代谢产物的转基因生产细胞株.方法:诱导胡萝卜(Daucus carota L.)愈伤组织,并建立胡萝卜悬浮细胞系.利用植物双元表达载体pMC-GUS转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101并侵染胡萝卜悬浮细胞,经潮霉素筛选得到阳性克隆,24孔板培养后离心检测GUS表达,GUS染色较深克隆100 mL锥形瓶传代1月,再次染色确认基因整合稳定性.结果:驯化获得胡萝卜悬浮细胞系,转基因后筛选得到阳性克隆,经GUS检测获得表达较高的细胞克隆,克隆于100 mL锥形瓶传代1月,GUS染色确认基因已稳定整合至胡萝卜悬浮细胞基因组.结论:成功驯化获得胡萝卜悬浮细胞系,并通过转基因技术筛选得到表达GUS蛋白的转基因悬浮细胞株,基因稳定整合至胡萝卜细胞基因组.该方法筛选得到的转基因细胞株具备开发成为生产细胞系的潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	应栩华		6	0	0.0	0.0
2	陈观平		4	0	0.0	0.0
3	王刚		3	0	0.0	0.0
4	汪一帆		4	0	0.0	0.0