Ghrelin通过JNK信号通路抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞凋亡

• 作者: 何婉媚 曾勉 李斌 黄春容
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: ghrelin 凋亡 内毒素 肺泡巨噬细胞 c-Jun N-terminal kinase (JNK)
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 181-188
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 字数: 4926字
• 语种: 中文

摘要

[目的]观察体外条件下加入外源性ghrelin对内毒素(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR8383凋亡以及吞噬能力的影响,并探讨JNK(c-Jun N-terminal kinase)信号通路在其中所起的作用.[方法]用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测加入LPS或者ghrelin与LPS共孵育后NR8383的细胞毒性;流式细胞技术、原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;Western blot检测JNK、phospho-JNK信号通路蛋白以及cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2凋亡相关分子蛋白的表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力;使用ghrelin受体拮抗剂[D-Lys-3]-GHRP-6、JNK特异性抑制剂SP600125分别抑制ghrelin受体及JNK激酶的激活.[结果]CCK-8检测结果显示LPS可显著抑制NR8383增殖,而ghrelin可呈浓度依赖性地阻断这种抑制作用;流式和TUNEL检测进一步证实ghrelin可显著降低LPS所致NR8383凋亡作用(P＜0.05),而应用ghrelin受体拮抗剂[D-Lys-3]-GHRP-6可以减弱ghrelin的抗凋亡效果(P＜ 0.05);LPS可以激活JNK激酶活性,并改变其下游凋亡相关蛋白的表达,其中促凋亡蛋白Bax以及cleaved caspase-3表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,应用ghrelin可以逆转LPS对JNK激酶的激活,继而下调Bax以及cleaved caspase-3的表达,上调Bcl-2的表达,差异均具有统计学意义(P＜0.05);ghrelin还可以维持LPS持续刺激下NR8383的吞噬能力(P＜0.05).[结论]ghrelin通过下调JNK信号通路的激活抑制LPS诱导的NR8383的凋亡,并维持其吞噬能力.