PINK1对酪氨酸羟化酶的表达调控

• 作者: 杨慧 贾焕珍 鲁玲玲
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 帕金森病 PINK1 RNA干扰 酪氨酸羟化酶 MN9D细胞
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1088-1092
• 页数: 5页
• 分类号: R329.28
• 字数: 3403字
• 语种: 中文
• DOI: 11.13753/j.issn.1007-6611.2015.11.009

摘要

目的 探讨帕金森病相关基因PINK1对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达调控作用. 方法 分别建立PINK1基因敲减组(转染携带有PINK1小干扰RNA片段的质粒)和PINK1基因过表达(转染PINK1真核表达质粒载体)的MN9D细胞模型,通过实时定量PCR法(real-time RT-PCR)和Western blot法分别检测THmRNA水平和蛋白水平,以评测改变细胞内PINK1含量对于TH表达的影响. 结果 在转染后48 h检测时发现,PINK1基因敲减组较对照组TH mRNA水平下调可达76.3％ (P ＜0.001);与对照组相比,蛋白水平亦明显降低,降低幅度达74.1％ (P ＜0.001).与此同时,检测到p-TH的蛋白水平也降低约75.1％ (P ＜0.001),但是p-TH/TH的水平没有明显改变.在MN9D细胞中瞬时转染PINK1野生型及突变体G309D,发现过表达野生型PINK1组TH蛋白水平明显增加(增加115.9％,P＜0.05),但是过表达PINK1突变体G309D组无明显差异(P＞0.05). 结论 PINK1可调节多巴胺合成过程中的限速酶TH的转录及蛋白的表达,而其G309D突变体表现为此项功能的缺失.