非 O157产志贺毒素大肠埃希菌分离株eae 基因分型分析

• 作者: 周娟 熊衍文 白向宁 许彦梅 赵爱兰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 非O157产志贺毒素大肠埃希菌 eae基因 MLST 分型
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 414-418
• 页数: 5页
• 字数: 4183字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.06.003

摘要

目的：了解我国不同来源非O157产志贺毒素大肠埃希菌（ Shiga toxin-producing Esche-richia coli， STEC）分离株携带的eae基因型别。方法 PCR扩增eae全长基因，扩增产物经测序并拼接后在美国国立生物技术信息中心（ NCBI）中进行BLASTn比对，判定其eae基因型别，并与GenBank中已公布的30种 eae 不同型别的序列及产志贺毒素大肠埃希菌主要流行血清型（ O157∶H7， O26∶H11， O103∶H2， O111∶H8， O145∶H28， O45∶H2， O121∶H19）代表性基因组测序菌株的eae序列用Neighbor-Joining法构建系统发生树，分析其进化关系。根据mlst．ucc．ie数据库提供的大肠埃希菌多位点序列分型（ multilocus sequence typing， MLST）方案对菌株进行MLST分型分析，确定菌株等位基因型及序列类型，并用BioNumerics软件构建最小生成树（ minimum spanning tree， MST），分析携带eae基因的非O157 STEC分离株与溶血性尿毒综合征相关大肠埃希菌（ HUS-associated en-terohemorrhagic E．coli，HUSEC）、E．coli MLST数据库中所有人源流行血清群O26、O103、O111、O121、O145、O157 STEC菌株的进化关系。结果10株不同来源的非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离株经扩增拼接后均获得了约2．8 kb的eae基因全长序列，分为3种已知的eae基因型别，其中以β1型为主（6／10），2株θ型，2株γ1型。某些eae序列与主要流行血清型STEC的eae序列完全一致。10株菌分为7个ST型，与HUSEC、人源流行血清群STEC菌株具有相近的进化关系。结论我国非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离株eae基因存在一定程度的多样性，eae阳性菌株具有潜在的高致病性。