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摘要:
目的:克隆表达并研究cnot2(CCR4-NOT转录复合体亚基2)基因在哺乳动物生物钟信号通路中的作用,为进一步研究生物钟信号通路提供理论依据。方法提取B6小鼠的总RNA进行体外反转得到cDNA。依据小鼠的基因序列设计合成一对特异性引物,以反转录的小鼠cDNA为模板,扩增得到cnot2的基因片段。将基因克隆到表达载体,转染HEK293T细胞系,获得总蛋白后通过Western blot检测该基因在体外是否成功表达。然后设计实验体系,收集细胞利用报告基因检测试剂盒检测per1-luc的活性,最后通过免疫共沉淀技术证明cnot2与主要生物钟基因之间的相互作用。结果 cnot2基因能够抑制哺乳动物生物钟基因bmal1和clock的转录活性,其可能的机制是cnot2能够竞争性地结合bmal1和clock,使bmal1-clock复合体的转录活性降低。结论 cnot2基因是生物钟信号通路中的一个负向因子。
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文献信息
篇名 cnot2基因是生物钟信号通路中的一个负向因子
来源期刊 中国血液流变学杂志 学科 生物学
关键词 小鼠 cnot2 特异性 RT-PCR Western blot
年,卷(期) 2015,(3) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 263-266
页数 4页 分类号 Q811.213
字数 3856字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-881X.2015.03.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张云峰 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 13 39 4.0 5.0
2 冯永杰 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 3 0 0.0 0.0
3 秦海棠 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 1 0 0.0 0.0
4 张双艳 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 1 0 0.0 0.0
5 胡孟娜 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
小鼠
cnot2
特异性
RT-PCR
Western blot
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国血液流变学杂志
季刊
1009-881X
32-1625/R
大16开
苏州市人民路708号苏大南校区
1991
chi
出版文献量(篇)
4839
总下载数(次)
5
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