大豆生物钟基因GmLNK1/2、GmRVE4/8和GmTOC1 CRISPR/Cas9组织表达分析及敲除靶点的鉴定

• 作者: 甘卓然 石文茜 黎永力 侯智红 李海洋 程群 董利东 刘宝辉 芦思佳
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 大豆 基因敲除 生物钟基因 CRISPR/Cas9
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1291-1300
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2020.94169

摘要

生物钟基因能够参与调控植物的整个生命进程, 对提高作物产量具有重要的作用。LNK1 (NIGHT LIGHT- INDUCIBLE AND CLOCK-REGULATED 1)、LNK2、RVE4 (REVEILLE 4)、RVE8 (REVEILLE 8)和TOC1 (TIMING OF CAB EXPRESSION 1)是植物中重要的生物钟基因。本研究利用BLAST同源比对和进化树分析的方法分别鉴定AtLNK1、AtLNK2、AtRVE4、AtRVE8和AtTOC1在大豆中的同源基因, 通过qRT-PCR实验证明这些生物钟基因在大豆根、茎、叶等组织中均有表达。成功构建这些基因的CRISPR/Cas9敲除载体, 并利用大豆根毛转化体系成功鉴定出13个基因的CRISPR/CAS9有效靶点。为进一步获得稳定的大豆突变体材料及研究其生物钟基因的功能提供了理论基础。