改良的成年SD大鼠心室肌细胞分离与培养方法

• 作者: 吕南英 殷春霞 苏浩 谭文 陈耀旭 韩福平 黄礼杰
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 成年大鼠 心室肌细胞 分离 原代培养
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 医学药剂
• 页码范围: 518-521
• 页数: 4页
• 分类号: R965.2
• 字数: 4067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2015.04.022

摘要

目的 建立稳定高效的成年大鼠心室肌细胞分离与培养方法.方法 成年SD大鼠麻醉后,迅速开胸取心,将主动脉连接于Langendorff装置上进行逆向灌流,用0.8 mg/mL Ⅱ型胶原酶和0.1 mg/mL蛋白酶双酶灌注消化分离心肌细胞,采用自然沉降法纯化心室肌细胞,一部分细胞用改良的M199培养基进行细胞培养,另一部分使用台盼蓝染色进行细胞活性检测并计数,同时使用激光共聚焦显微镜观察细胞收缩及钙瞬变.结果 本方法可获得(81.9±2.2)％具有活性的成年大鼠心室肌细胞,每只SD大鼠心脏的细胞产量可达(2.0±0.1)×107个,电刺激时细胞同步稳定收缩.结论 该分离和培养方法高效、稳定,分离出的细胞活性高,产量高,可用于原代培养.