miR-141-3P和miR-346在对靶基因FSHR的识别与验证

• 作者: 吴健 姜昊 张国梁 戴立胜 袁宝 许橙 陈健 韩东旭 高妍
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大鼠 腺垂体 微小RNA 繁殖调控 促卵泡素受体基因
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1856-1862
• 分类号: S858.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2015.11.25

摘要

为探索miRNA-141-3P和miRNA-346在大鼠腺垂体中的靶基因,并对其进行识别与验证.本研究利用PCR方法,根据Fshr (Rattus) 3'UTR野生型载体序列信息设计突变引物将靶序列CAGTGTT (78-85)突变为GTCA-CAA和GGCAGAC(127-133)突变为CCGTCTG,以野生型载体为模板PCR扩增Fshr基因的3 ' UTR突变序列,将其克隆到pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告载体中.由于miRNA是通过3 ' UTR区作用于靶基因,因此将miRNA与构建好的报告基因载体共转,通过报告基因相对荧光值的下调来印证miRNA与靶基因的相互作用.双荧光素酶报告基因表达分析显示,rno-miR-141-3p mimic对Fshr野生型载体的报告荧光没有明显下调作用;rno-miR-346 mimic对Fshr野生型载体的报告荧光有明显下调作用,相应结合位点突变后,突变型载体中的报告荧光与野生型相比有所恢复;rno-miR-141-3p mimic和rno-miR-346 mimic同时处理,对野生型载体的报告荧光有一定的下调作用.在体外,rno-miR-141 3p可能不能通过Fshr上相应的3UTR位点调控报告基因的表达;rno-miR-346有可能通过Fshr上相应的3'UTR位点调控报告基因的表达.本试验为FSHR的转录后调控研究提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈健	吉林大学动物科学学院	44	285	11.0	16.0
2	袁宝	吉林大学动物科学学院	39	187	9.0	12.0
3	姜昊	吉林大学动物科学学院	18	50	3.0	6.0
4	戴立胜	吉林大学动物科学学院	13	45	3.0	6.0
5	许橙	吉林大学动物科学学院	1	3	1.0	1.0
6	韩东旭	吉林大学动物科学学院	1	3	1.0	1.0