大鼠弥漫性轴索损伤后高迁移率族蛋白1的动态表达及其对神经细胞凋亡的影响

• 作者: 孙鹏 安吉洋 宋锦宁 庞宏刚 李丹东 翟海程 赵永林 黄廷钦
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 创伤性颅脑损伤 弥漫性轴索损伤 炎症反应 高迁移率族蛋白 1 凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 304-309
• 页数: 6页
• 分类号: R651.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201503004

摘要

目的：研究高迁移率族蛋白1(HMGB-1)在弥漫性轴索损伤(DAI)后脑组织内的动态表达及其对神经细胞凋亡的影响,探讨其参与 DAI 后脑组织炎症反应的机制。方法采用大鼠头颅瞬间旋转装置制备大鼠 DAI 模型,通过组织病理学方法评价 DAI 模型的稳定性,采用免疫组化、Western blot、RT-PCR 等方法分别于造模后6 h,1、3、7 d 为时间点,测定 DAI 后 HMGB-1的表达及分布变化,并采用 TUNEL 试剂盒进一步观察 DAI 后神经元的凋亡。结果免疫组化结果显示,在 DAI 后6 h 及1 d,大鼠皮层脑组织中 HMGB-1阳性细胞数呈下降趋势,但是3 d 后开始明显增多；Western blot 结果证实,DAI 后早期(6 h、1 d),皮层脑组织中 HMGB-1蛋白水平较对照组显著降低,然而在 DAI后3 d 出现明显升高,一直持续至第7天；RT-PCR 显示,DAI 后早期(6 h)HMGB-1 mRNA 水平并无明显增加,DAI后1 d 仅有轻度增加,DAI 后3 d HMGB-1 mRNA 水平才开始明显升高。TUNEL 结果显示,在 DAI 后6 h 神经元凋亡已明显增加,并呈持续增加趋势,DAI 后3 d 达到高峰,一直持续至 DAI 后7 d 仍处于较高水平。结论大鼠 DAI后脑组织内 HMGB-1表达呈逐渐升高的动态变化,其脑组织总蛋白水平早期(6 h、1 d)降低,可能由坏死神经元释放及基因转录水平较低所致,而晚期(3、7 d)明显升高,可能是胶质细胞活化诱导基因表达升高所致,HMGB-1与神经元凋亡并无直接相关性,其可能通过诱导炎症反应间接参与 DAI 后的神经元凋亡。