Flightless Ⅰ与核质转运蛋白Importin β及核孔蛋白Nup88的相互作用

• 作者: 刘小会 廖声友 徐凤梅 汤冬娥 熊海庭 王翠华 贺玉娇 高学娟 魏金梅
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 分子生物学 RNA转运 GST-pull down 免疫共沉淀 Flightless Ⅰ Importin β Nup88
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 1247-1254
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.150047

摘要

Fightless Ⅰ(FLⅡ)是一个在肿瘤中高表达的蛋白,前期研究提示FLⅡ可能参与核质转运过程,为鉴定FLⅡ是否与核膜结合蛋白相互作用,构建GST-FLⅡ、GST-LRR融合蛋白重组质粒并转化至大肠杆菌Rosetta进行诱导表达,使用GST琼脂糖珠进行融合蛋白的纯化.通过SDS-PAGE对纯化蛋白进行验证之后,利用GST-pull down及免疫共沉淀技术证明了FLⅡ与Importin β、Nup88蛋白的相互作用,并鉴定FLⅡ上的LRR结构域为相互作用区域.研究结果提示FLⅡ可能参与了Importin β的部分生物学作用,为进一步分析FLⅡ与Importin β、Nup88的生物学功能奠定了基础.