海马齿Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（SpP5CS）基因的克隆和表达分析

• 作者: 杨成龙 段瑞军 申龙斌 郭建春
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 海马齿 SpP5CS 盐胁迫 表达分析
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1933-1941
• 页数: 9页
• 语种: 中文

摘要

以海马齿为材料,根据已克隆的P5CS基因的保守序列设计简并引物,利用RT-PCR和RACE技术从海马齿中获得了一个海马齿Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因。该基因cDNA序列全长2452 bp,其中包括开放读码框为2169 bp、5′-UTR 52 bp和3′-UTR 231 bp,推断其编码722个氨基酸,分子量79.4 kDa,根据序列比对将其蛋白命名为SpP5CS。对该蛋白质序列进行生物信息学分析表明： SpP5CS与冰叶日中花、海蓬子和葡萄等双子叶植物相似性较高,而与小麦、狗尾草和水稻等单子叶植物相似性较低。荧光定量PCR分析表明,该基因在海马齿的叶中表达量最高,在茎中其次；海马齿SpP5CS基因在各部分中的表达量随着盐胁迫的时间延长在叶中变化最为明显：在400和600 mmol·L-1 NaCl胁迫9 h表达量最高,在800 mmol·L-1 NaCl胁迫12 h最高,其表达均表现先升高后降低的趋势。P5CS基因是植物体内合成脯氨酸的关键酶基因, SpP5CS基因的克隆将为作物抗逆分子育种和进一步的功能分析打下基础。