富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因过表达增强膀胱癌T24细胞对顺铂敏感性的实验研究

• 作者: 严泽军 周成 夏术阶 程跃 蒋军辉 蒋照辉 谢国海 钱君海
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 关键词: 富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因 顺铂 膀胱肿瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 膀胱癌研究
• 页码范围: 505-510
• 页数: 6页
• 字数: 4394字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6702.2015.07.008

摘要

目的 探讨富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1 (leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-1,LRIG1)基因过表达对膀胱癌T24细胞顺铂(cis-diaminodichloroplatinum,CDDP)敏感性的影响及其机制.方法 2012年12月至2014年2月选取膀胱癌T24细胞株,将建立并鉴定的过表达LRIG1基因的T24细胞分为3组:实验组,转染Ad-Surp-LRIGl;对照组,转染Adeno-SP-EGFP;空白组,未转染.将3组细胞分别加入CDDP,构建为CDDP/Ad-Surp-LRIG1组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组、CDDP组,与未加入CDDP的空白组共4组进行诱导凋亡实验.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后T24细胞中LRIG1和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达水平.蛋白质印迹法检测CDDP对T24细胞的总EGFR和核磷酸化EGFR表达的影响.采用CCK-8法检测各组细胞对CDDP的敏感性.流式细胞学检测各组细胞的凋亡率.结果 实验组、对照组和空白组的LRIG1 mRNA和EGFR mRNA的表达量分别为2.79±0.15和0.65±0.05、0.76±0.09和1.98±0.07、0.66±0.05和2.05±0.04,LRIG1蛋白和EGFR蛋白分别为1.98±0.12和0.92±0.05、0.88 ±0.07和2.51 ±0.07、1.00 ±0.08和2.42±0.09,实验组与对照组和空白组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),对照组与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).CDDP组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的半数抑制浓度IC50值分别为(30.96±0.57)、(31.55 ±0.48)和(14.09±0.31) μg/ml,CDDP组与CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异无统计学意义(P＞0.05).CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的细胞凋亡率[(69.77±2.14)％]高于CDDP/Adeno-SP-EGFP组[(48.15±1.53)％]、CDDP组[(46.82±1.23)％]、空白组[(3.17±0.21)％],差异均有统计学意义(P＜0.05),CDDP组和CDDP/Adeno-SP-EGFP组比较差异无统计学意义(P＞0.05).空白组、CDDP组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组、CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的总EGFR和核磷酸化EGFR的表达量分别为2.52±0.11和1.76±0.08、1.22±0.05和2.75±0.15、1.25±0.05和2.82±0.13、0.32 ±0.02和1.08±0.04,CDDP组与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05),CDDP/Adeno-SP-EGFP组与CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异有统计学意义(P＜0.05),CDDP组与CDDP/Adeno-SP-EGFP组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LRIG1通过下调EGFR和核磷酸化EGFR的表达促进CDDP诱导的T24细胞凋亡,提高T24细胞对CDDP的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏术阶		170	1141	17.0	25.0
2	程跃		32	369	9.0	19.0