胃腺癌细胞中miR-23a靶基因PPP2R5E的鉴定

• 作者: 刘爱华 张科 朱丽华 李冀 李盖 章广玲
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃腺癌 MGC803 miR-23a PPP2R5E 靶基因
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: R735.2
• 字数: 5082字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证miR-23a的靶基因PPP2R5E.方法 选取表达绿色荧光蛋白的质粒pcDNA3/EGFP,将PPP2R5E-3' UTR的特异性序列插入其中,并与红色荧光蛋白表达质粒pDsRed2-N1及表达miR-23a的质粒共同稳定转染胃腺癌细胞MGC803,稳定转染后提取细胞蛋白,荧光分光光度计进行定量检测.并通过半定量RT-PCR、实时定量PCR检测miR-23a功能受抑制或过表达miR-23a的MGC803细胞或胃腺癌组织中PPP2R5E基因mRNA的表达情况,验证miR-23a对其调控作用.表达siRNA抑制MGC803中PPP2R5E mRNA的表达后,通过MTT和平板克隆形成实验观察其对胃腺癌细胞系MGC803细胞活性和克隆形成能力的影响.结果 绿色荧光蛋白的表达量,稳定转染pcDNA3/EGFP-PPP2R5E-3' UTR质粒和miR-23a质粒组明显低于pcDNA3/EGFP-PPP2R5E-3' UTR和pcDNA3共同稳定转染组.miR-23a功能受抑制的胃腺癌细胞MGC803中靶基因PPP2R5E的mRNA表达水平升高;相反,过表达miR-23a的胃腺癌细胞MGC803及胃腺癌组织中靶基因PPP2R5E的mRNA表达水平下降.沉默MGC803细胞中的PPP2R5E后,细胞活性和克隆形成能力均加强.结论 PPP2R5E可能是miR-23a的直接靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李冀	河北联合大学基础医学院病原生物学科	28	58	4.0	7.0
2	朱丽华	河北联合大学基础医学院病原生物学科	40	126	6.0	8.0
3	张科	河北联合大学继续教育学院	9	14	2.0	3.0
4	刘爱华	河北联合大学基础医学院病原生物学科	12	44	4.0	6.0
5	章广玲	河北联合大学基础医学院病原生物学科	38	123	6.0	8.0
6	李盖	河北联合大学附属医院放射科	7	18	2.0	4.0