shRNA靶向干扰NHERF1对PC-3M前列腺癌细胞生物学行为的影响

• 作者: 刘强 刘鉴峰 宋娜玲 李德冠 焦延娜 郑君芳 马强 高红林
• 来源期刊: 国际肿瘤学杂志
• 关键词: 前列腺肿瘤 细胞凋亡 NHERF1
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 字数: 3356字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2015.01.004

摘要

目的 探讨shRNA靶向干扰钠氢交换调节因子(NHERF)1后对前列腺癌细胞PC-3M生物学行为的影响.方法 将pSuper.puro NHERF1 shRNA质粒和阴性对照质粒pSuper.puro luciferase shRNA分别转染人PC-3M前列腺癌细胞,经嘌呤霉素筛选,建立稳定低表达NHERF1的PC-3M细胞株.经Western印迹验证后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测肿瘤细胞增殖活性,采用划痕实验检测NHERF1-shRNA对前列腺癌PC-3M细胞迁移能力的影响,采用流式细胞仪检测NHERF1-shRNA对PC-3M细胞凋亡的影响,采用Western印迹检测NHERF1-shRNA对凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2表达的影响.结果 转染NHERF1-shRNA组比未转染及空载组细胞的增殖能力明显降低(F=62.63,P=0.004);转染NHERF1-shRNA组比未转染及空载组细胞的迁移率明显降低.相比于未转染PC-3M细胞和转染阴性对照质粒细胞,转染NHERF1-shRNA组细胞的凋亡百分比明显增加[(2.55±0.92)％和(11.98±3.28)％],达4倍以上(t=-2.392,P=0.001);Bcl-2蛋白的表达降低,Bax蛋白的表达升高.结论 靶向NHERF1的序列特异性shRNA可抑制PC-3M细胞的增殖和迁移,并促进细胞凋亡.