腺相关病毒AAV2/8-CaMKⅡα-ChR2-mCherry的组织学及通道功能鉴定

• 作者: 刘树雷 吴广延 孙琳 曹文富 隋建峰
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 光遗传学 腺相关病毒 ChR2
• 年，卷（期）: 2015,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1297-1301
• 分类号: R-332|R373|R394
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.201502106

摘要

目的 对腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry在大鼠内侧前额叶谷氨酸能神经元中表达的组织学及通道功能予以鉴定.方法 以立体定位注射技术将腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry注射到SD雄性大鼠内侧前额叶,当病毒注射3～4周后,采用免疫荧光组织化学技术检测标记蛋白(mCherry)在谷氨酸能神经元(特异启动子CaMKIIα)的表达情况;利用在体细胞外记录技术观测谷氨酸能神经元所表达的通道蛋白(ChR2)对不同光刺激频率的电生理反应特性.结果 病毒成功注射到内侧前额叶并特异表达通道蛋白于谷氨酸能神经元的细胞膜上,表达成功率为(94.6±0.9)％;表达ChR2通道蛋白的谷氨酸能神经元对蓝光(470 nm,20 mW/mm2,5 ms波宽,5～80 Hz)产生稳定的光激活反应,并且对低频光刺激(5、10、20 Hz)的反应性优于高频光刺激(40 Hz和80 Hz;P ＜0.001).结论 腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry能成功表达在谷氨酸能神经元的细胞膜上,对光刺激有频率选择性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹文富	重庆医科大学中医药学院中医药教研室	107	774	13.0	23.0
2	隋建峰	第三军医大学基础医学部教学实验中心	87	349	9.0	14.0
3	吴广延	第三军医大学基础医学部教学实验中心	10	8	2.0	2.0
4	孙琳	第三军医大学基础医学部教学实验中心	1	1	1.0	1.0