MicroRNA-17家族真核表达载体的构建及其对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响

• 作者: 孙宏飞 宋土生 杨阳 王晓霏 赵凌宇 陈妍珂 黄辰
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: miR-17家族 肝癌 表达载体 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 肝与肝病
• 页码范围: 523-527,607
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3476字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2015.06.006

摘要

目的 构建miR-17家族(miR-17、miR-20a、miR-20b、miR-93、miR-106a、miR-106b)真核表达载体,探究它们对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖的影响.方法 通过EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切真核表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR,得到大片段后与人工合成的miR-17家族成熟体5p的寡聚核苷酸连接,通过DNA测序、BLAST检验以及双酶切电泳方法验证是否成功构建miR-17家族的真核表达载体.将构建成功的载体,用Lipofectamine2000瞬时转染人肝癌SMMC-7721细胞,应用real-time PCR方法检测miR-17家族表达水平,用CCK8法检测细胞增殖能力的变化.结果 双酶切真核表达载体pcDNA 6.2-GW/EmGFP-miR,得到的大片段与人工合成的miR-17家族成熟体5p寡聚核苷酸连接,通过DNA测序、BLAST检验及双酶切电泳的方法验证成功构建了miR-17家族真核表达载体.瞬时转染人肝癌SMMC-7721细胞后miR-17家族表达水平有了显著增加,能够促进SMMC-7721细胞的体外增殖.结论 成功构建miR-17家族真核表达载体,得到瞬时转染miR-17家族的人肝癌SMMC-7721细胞,并观察到miR-17家族过表达可以促进人肝癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄辰	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	53	336	8.0	16.0
2	宋土生	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	30	180	8.0	12.0
3	赵凌宇	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	12	23	2.0	4.0
4	陈妍珂	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	6	7	2.0	2.0
5	王晓霏	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	4	1	1.0	1.0
6	杨阳	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	26	76	3.0	8.0
7	孙宏飞	西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系	1	1	1.0	1.0