大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞原代培养方法的改进

• 作者: 孟立平 池菊芳 蒋承建 赵飞 郭航远 郭艳
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 原代细胞 血管平滑肌细胞 组织贴块法 血小板源性生长因子B
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 页码范围: 593-596
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 字数: 2905字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2015.08.011

摘要

目的：探索提高大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）原代培养效率和纯度的方法。方法：在原有组织贴块法培育大鼠原代VSMCs的基础上进行改良，分离出胸主动脉后进一步分离中膜，DMEM高糖培养基中加入10μg/L血小板源性生长因子B（PDGF-B）。用细胞形态学及细胞免疫荧光对VSMCs进行鉴定。结果：6 d左右组织块周围有细胞爬出，12 d左右可以传代。镜下见细胞呈梭形，典型“峰谷”状排列生长；免疫荧光鉴定可见大量平滑肌肌动蛋白（SMA），比传统方法获得的细胞纯度高。结论：加入PDGF-B可以缩短大鼠VSMCs原代培养时间，提高效率；剥离中膜可以提高大鼠VSMCs原代细胞的纯度。