玉米赤霉烯酮对TM3细胞原癌基因及细胞间隙连接通讯的影响

• 作者: 刘学忠 刘宗平 周婷婷 徐辉 王宜安 袁燕 顾建红 黄攀 黄沁怡
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米赤霉烯酮 TM3细胞 原癌基因 细胞间隙连接通讯 Cx43蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 467-471
• 分类号: S852.2
• 语种: 中文

摘要

为探讨玉米赤霉烯酮(ZEA)的雄性生殖毒性及其机制,本试验以TM3细胞为材料,加入不同浓度的ZEA,设对照组,5、10、20μg/L ZEA染毒组,培养72 h后,应用噻唑蓝比色法(MTT)检测TM3细胞活力,免疫印迹法检测原癌基因c-myc、c-fos、c-jun及连接蛋白Cx43、P-Cx43蛋白的表达情况,应用划痕标记染料示踪(SLDT)技术观察GJIC功能的变化,同时通过免疫荧光观察Cx43在细胞内的分布情况.结果显示,各ZEA染毒组对TM3细胞生长有一定的促进作用;免疫印迹检测发现,与对照组相比,10、20 μg/L染毒组c-fos的表达量明显升高(P＜0.05),5、10、20 μg/L染毒组c-myc、c-jun表达量极显著增加(P＜0.01),而连接蛋白Cx43表达量在10μg/L染毒组中显著下降(P＜0.05),在20μg/L染毒组中极显著下降(P＜0.01),其磷酸化水平在20 μg/L染毒组显著下降(P＜0.05);荧光显微镜观察到10、20μg/L染毒组荧光黄(LY)在细胞间的扩散距离较对照组有极显著下降(P＜0.01);ZEA染毒后,分布于细胞膜上的Cx43逐渐减少,出现在细胞质和细胞核上.结果表明,低浓度的ZEA即可诱发Cx43及其磷酸化水平的下调,Cx43在细胞内的异常分布,导致GJIC的功能受到抑制,同时引起原癌基因c-myc、c-fos、c-jun异常的表达,低浓度的ZEA对TM3细胞的增殖产生了明显的促进作用.