miR-19b 沉默对 P19细胞分化及线粒体功能的影响

• 作者: 余章斌 刘雪华 彭宇竹 朱春 朱莎莎 朱金改 李萌萌 胡晓山 韩树萍
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-19b沉默 P19细胞 线粒体 分化
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 704-709
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2015.05.005

摘要

目的：通过沉默微小RNA-19b（ miR-19b）研究miR-19b对P19细胞分化及线粒体功能的影响。方法：转染miR-19 b沉默质粒与空载质粒进入P19细胞建立起稳定的细胞系；线粒体功能分析用以检测细胞凋亡；诱导分化 P19细胞，实时定量荧光 PCR 检测 miR-19 b 沉默后细胞分化关键基因表达水平。结果：TargetScan 5.1软件及双荧光素酶报告基因系统共同证实，Wnt1为miR-19b在P19细胞中发挥作用的靶点（ P＜0.05）；测定第0、4、6、8、10、12天cTnT、NKX2.5、GATA4等基因的核酸表达量显示，心肌分化相关标志基因逐渐增高，miR-19 b沉默组明显低于对照组（ P＜0.05）；于分化第10天检测线粒体功能，发现miR-19 b沉默组线粒体DNA拷贝数的相对含量高于对照组，其活性氧水平显著低于对照组，ATP水平也高于对照组（均P＜0.05）。结论：miR-19b沉默可抑制细胞凋亡，抑制心肌细胞分化。