羊源肠球菌属与屎肠球菌双重PCR检测方法的建立

• 作者: 凤英 刘昆 吴树清 宋越 张月梅 杨斌 赵世华 陈伟 高娃
• 来源期刊: 畜牧与饲料科学
• 学科: 农学
• 关键词: 羊源 屎肠球菌 肠球菌 双重PCR
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 基础科学
• 页码范围: 9-12,16
• 页数: 5页
• 分类号: S858.265.11|S854.43
• 字数: 3334字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立羊源肠球菌属与屎肠球菌的双重PCR检测方法，对临床分离的菌株进行快速检测。[方法]设计肠球菌属特异性和屎肠球菌种特异性引物，建立双重PCR反应体系；评价双重PCR反应的特异性和敏感性；利用混合菌液制备模拟感染样品，确定双重PCR反应对模拟感染样品检测的特异性和敏感性。[结果]建立的双重PCR反应能够特异性的扩增肠球菌属（294 bp）和屎肠球菌（557 bp） DNA片段；该方法对常见的动物源细菌无交叉反应，对肠球菌属的最低检测量为5.71×10-5 ng/μL，对屎肠球菌的最低检测量为5.71×10-4 ng/μL；双重PCR反应能够特异性的检测模拟感染样品中的肠球菌属和屎肠球菌，对于模拟感染样品中的屎肠球菌检测量为1×101 CFU/mL。[结论]建立的双重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点，为快速鉴定屎肠球菌提供了快速、准确的方法。