用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞来源的诱导多能干细胞

• 作者: 刘安 张菁菁 李雅红 林颖 梁栋 王艳 胡平 胡焕然 马定远
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人外周血单个核细胞 重编程 诱导多能干细胞 非整合 仙台病毒
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 740-743
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 3743字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2015.10.06

摘要

目的 用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞(PBMC)来源诱导多能干细胞(iPSC).方法 收集健康人外周血标本,分离PBMC,用含4个重编程转录因子(OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC)的仙台病毒感染PBMC,并用无饲养层细胞的培养体系培育获得iPSC.通过细胞形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色、拟胚体形成和分化实验对iPSC细胞进行多能性验证;用核型分析和仙台病毒基因组RNA检测对其进行安全性验证.结果 在仙台病毒感染后16 d后,PBMC出现iPSC样克隆.iPSC可进行传代培养,且经多能性验证实验证明其具有多能性;安全性验证结果表明,iPSC核型正常,外源性病毒基因组RNA可被完全清除.结论 建立了对PBMC进行非整合重编程的诱导体系,并获得了具有多能性、核型正常且不合外源基因的iPSC.