产气荚膜梭菌β毒素的表达及其抗血清的制备

• 作者: 彭国瑞 彭小兵 李旭妮 王猛 田冬青 蒋玉文
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 产气荚膜梭菌 β毒素 克隆表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 93-96
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4510字
• 语种: 中文

摘要

PCR扩增B型产气荚膜梭菌C58-2株β毒素完整成熟肽序列,将942 bp的基因片段以正确的阅读框架定向克隆于pET-32a(+)中,然后将重组质粒转化进宿主菌BL21 (DE3)中,在37℃1 mmol/L IPTG诱导下该片段获得良好表达.经SDS-PAGE分析,其表达的蛋白约为54.6ku,与预期值一致.Western blot显示,该重组蛋白可被C型产气荚膜梭菌血清识别,表明该重组蛋白具备与天然毒素相类似的反应原性.重组β毒素蛋白在菌液上清、超声波裂解上清和包涵体中均有分布,且以包涵体为主,表明重组蛋白可同时以胞外、周质和胞浆的形式表达.小鼠试验表明,重组β毒素蛋白不具有毒性.毒素-抗毒素中和试验表明,该抗血清具有β毒素特异性.以重组β毒素蛋白作为抗原免疫家兔,每0.1mL的一免、二免、三免后抗血清分别可以中和10、20、50个小鼠MLD的C型毒素.结果表明,试验所获得的重组菌株有望成为产气荚膜梭菌β类毒素生产的候选菌株,所制备的抗血清有望进一步研制成为抗β毒素国家标准品.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭妮		22	53	5.0	6.0
2	蒋玉文		72	389	11.0	17.0
3	彭小兵		35	163	6.0	12.0
4	彭国瑞		29	37	3.0	4.0
5	王猛		4	10	2.0	3.0
6	田冬青		1	6	1.0	1.0