长链非编码RNA MALAT1影响口腔鳞状细胞癌侵袭的实验研究

• 作者: 何清华 刘速 司海山 周旋 岳恺 段远胜 王佳鑫 王旭东 王晓非
• 来源期刊: 中国肿瘤临床
• 关键词: 肺腺癌转移相关转录因子1 口腔鳞状细胞癌 肿瘤侵袭 EMT
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 特约综述
• 页码范围: 460-465
• 页数: 6页
• 字数: 5023字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.20150313

摘要

目的：探讨肺腺癌转移相关转录因子1（metastasis-associated lungadenocarcinoma transcript 1，MALAT1）对口腔鳞状细胞癌侵袭能力的影响。方法：应用RT-PCR方法检测MALAT1在口腔鳞状细胞癌组织标本、正常口腔黏膜组织标本以及口腔鳞癌细胞系中的表达；利用小干扰RNA（siRNA）敲低MALAT1在人舌鳞状细胞癌细胞Tscca中的表达；MTT法检测细胞的增殖能力变化；划痕实验、Transwell实验检测肿瘤细胞迁移、侵袭能力的变化；蛋白质印迹法检测肿瘤细胞迁移、侵袭及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）等相关蛋白的表达变化；免疫荧光法检测细胞EMT相关蛋白表达变化；建立Tscca裸鼠皮下荷瘤模型，免疫组织化学染色法检测细胞增殖、侵袭相关蛋白表达。结果：MALAT1在口腔鳞癌组织中的表达明显高于正常组织。抑制MALAT1表达后细胞增殖率下降，细胞系划痕闭合减慢，通过Transwell小室聚碳酸酯膜的细胞数减少，与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；基质金属蛋白酶-2、-9（MMP-2、MMP-9）、神经钙黏素（N-cadherin）蛋白表达水平明显下调，钙黏着蛋白（E-cadherin）表达水平上调。免疫荧光显示，细胞神经钙黏素荧光强度明显减弱，钙黏着蛋白荧光强度显著增强。体内实验结果显示，MALAT1 siRNA治疗组裸鼠皮下荷瘤体积小于空白对照组及无义序列组（F=18.664，P<0.001）；免疫组织化学染色结果示，MALAT1 siRNA治疗组中增殖核抗原（PCNA）、MMP-2、MMP-9表达减少。结论：MALAT1在口腔鳞癌组织中过表达，敲低人舌鳞癌细胞中MALAT1的表达可抑制舌鳞癌细胞的迁移、侵袭能力，MALAT1可能通过调控EMT促进口腔鳞癌的增殖和侵袭过程。