猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒非结构蛋白nsp1α的表达及活性检测

• 作者: 乔松林 史西保 司朝朝 张改平 李恭贺 李青梅 王丽 王寅彪 王超 陈静
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 非结构蛋白1α 重组蛋白 免疫学活性
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧? 兽医
• 页码范围: 126-129
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3110字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2015.01.028

摘要

为获得具有活性的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒( PRRSV)非结构蛋白1α( nsp1α),以BJ-4 PRRSV nsp1α真核表达质粒pcDNA3.1-nsp1α为模板扩增nsp1α,克隆到原核表达载体pET -28a,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导含有重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)。 SDS–PAGE结果显示,nsp1α以包涵体形式高效表达,重组蛋白大小约为20 ku；Western blot结果显示,表达的重组蛋白能与小鼠抗His标签单克隆抗体反应；包涵体蛋白复性后,ELISA方法检测结果显示,重组蛋白能与1∶6400稀释的PRRSV阳性血清反应。表明成功表达了nsp1α蛋白,且表达的重组蛋白具有较好的免疫学活性。