B型产气荚膜梭菌C58-1株ε毒素基因序列分析与可溶性表达

• 作者: 刘磊 张松林 林初文 沈志强 韩文瑜 马永彪
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 产气荚膜梭菌B型C58-1株 ε毒素基因 表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 29-32
• 页数: 4页
• 分类号: S852.616.3
• 字数: 3487字
• 语种: 中文

摘要

利用PCR技术从B型产气荚膜梭菌扩增出ε毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamH Ⅰ和Sal Ⅰ对其进行酶切,回收984 bp的ε毒素基因片段,将其定向克隆在载体PET-32a中,获得重组质粒pETε984.将pETε984转化至受体菌BL21 (DE3)中.重组菌株经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PACE分析.结果表明,重组目的蛋白在大肠埃希菌成功表达,融合蛋白大小为51 ku,存在于细菌培养上清中,可溶性蛋白占菌体总蛋白相对含量的67.8％.序列分析表明C58-1株e毒素蛋白序列与目前公布的所有B型和D型产气荚膜梭菌同源性均在99.7％以上,但ε毒素蛋白序列第321位出现了S→Y突变.研究结果为ε毒素蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈志强		525	1950	18.0	25.0
3	韩文瑜	吉林大学动物医学学院	159	1086	16.0	26.0
6	林初文	吉林大学动物医学学院	42	112	6.0	9.0
8	张松林		21	69	5.0	7.0
11	刘磊		5	1	1.0	1.0
12	马永彪		4	1	1.0	1.0