鸡Ii与B-L基因表达产物的细胞定位与结合活性特征

• 作者: 余为一 罗兰芳 陈芳芳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 恒定链 B-L Pull-down 表达 复合物
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 879-883,889
• 页数: 6页
• 分类号: S852.4
• 字数: 3503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.07.003

摘要

目的：研究鸡Ii与B-L基因表达产物在细胞内定位和互相结合的活性特征。方法：将克隆的Ii、B-LA和B-LB基因片段分别插入原核或真核表达质粒；然后分别单独转染或共转染工程菌Rosetta(DE3）或293T细胞。所有重组菌经鉴定后进行诱导表达后再复性。单一表达产物用免疫印迹检测它们的抗原性，共转染表达的产物用pull-down法和( SDS-） PAGE观察其互相结合特征。结果：成功构建了6个原核和真核表达重组质粒。在真核细胞中Ii、B-LA和B-LB基因表达产物定位于细胞浆膜，而原核表达产物经复性后和亲和层析纯化，获得单一蛋白分子。其次，原核表达的Ii 与B-LA和B-LB复性蛋白能够诱导产生鼠源抗体，这些抗体特异性结合真核表达产物，表明它们保持相同的免疫原性。最后，用pull-down从共转染的工程菌表达并复性的蛋白分子中分别获得纯化的Ii／B-LA和Ii／B-LB复合物，它们经SDS处理后分别被解离成单体。结论：鸡Ii和B-L基因的原核与真核表达的产物能够保持其抗原性，而原核共表达的Ii和B-L蛋白分子复性后可以互相结合。本研究的结果为进一步研究Ii与B分子关系提供了方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余为一	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	121	1025	17.0	25.0
2	陈芳芳	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	26	108	6.0	9.0
3	罗兰芳	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	3	3	1.0	1.0