宁夏肉牛皮肤病原真菌的分离与鉴定

• 作者: 何生虎 余永涛 张蕾蕾 王静 葛松 蒋万 郭澍强
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 肉牛 皮肤癣菌 ITS序列 系统发育分析 疣状毛癣菌
• 年，卷（期）: 2015,（14）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2876-2883
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.14.019

摘要

【目的】从患真菌性皮肤病肉牛的毛发、皮屑、痂皮等病料样本中分离皮肤病原真菌并对其进行种属分类鉴定，为牛真菌性皮肤病的诊断及防治提供参考依据。【方法】无菌采集宁夏地区患皮肤病肉牛的毛发、皮屑、痂皮，将病料样本置于载玻片上，滴加10% KOH溶液1滴，静置5 min后进行镜检观察；将病料样本接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）中进行真菌的分离、纯化培养，对分离的真菌用乳酸酚棉兰染液进行染色观察，根据真菌形态学特征对其进行初步分类；用分离的真菌制备浓度为1×108 cfu·mL-1的孢子悬液涂抹健康ICR小鼠皮肤，根据其致病性筛选病原真菌；提取病原真菌 DNA，对其内部转录间隔区（ITS）进行 PCR 扩增并测序，登录 NCBI GenBank数据库，对病原真菌ITS序列进行同源性比较并构建系统发育树，根据其同源性比较及系统发育分析结果，结合真菌形态学特征对病原真菌作出种属分类鉴定。【结果】病料中含真菌菌丝及链状厚垣孢子，毛发中存在大量小分生孢子；从病料样本中共分离、纯化到23株真菌，分属于毛癣菌属（Trichophyton）、曲霉属（Aspergillus）、横梗霉属（Lichtheimia）、链格孢属（Alternaria）、镰刀菌属（Fusarium）、附球菌属（Epicoccum）、毛霉菌属（Mucor）；小鼠皮肤感染试验表明，分离的毛癣菌属真菌NXGY1、NXGY2具有较强的致病性，试验组小鼠均出现瘙痒、皮屑增多、形成结痂、脱毛等临床症状；毛癣菌属NXGY1、NXGY2的ITS序列长度大小分别为660、662 bp，其同源性比较及系统发育分析结果表明，NXGY1、NXGY2与疣状毛癣菌(Trichophyton verrucosum)同源性高达99%，在系统发育树上属于同一分支，遗传距离最近。【结论】根据真菌形态特征及系统发育分析结果，鉴定分离的肉牛皮肤病原真菌NXGY1、NXGY2为疣状毛癣菌(T. verrucosum)。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王静	宁夏大学农学院	51	357	11.0	16.0
2	何生虎	宁夏大学农学院	116	648	14.0	21.0
3	张蕾蕾	宁夏大学农学院	6	34	3.0	5.0
4	余永涛	宁夏大学农学院	22	111	6.0	9.0
5	郭澍强	宁夏大学农学院	7	70	4.0	7.0
6	葛松	宁夏大学农学院	9	90	5.0	9.0