Nogo受体慢病毒干扰载体在大鼠神经干细胞中的表达及其干扰效率鉴定

• 作者: 刘欣春 朱悦
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Nogo受体 神经干细胞 慢病毒
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 60-63
• 页数: 4页
• 分类号: Q421
• 字数: 4131字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2015.11.017

摘要

目的 在体外分离培养的大鼠神经干细胞内,通过慢病毒介导的shRNA实现持续稳定的NgR沉默.方法 设计并合成表达NgR shRNA的慢病毒载体,通过转染293T细胞系收集包装好的病毒颗粒.分离培养初生大鼠脊髓神经干细胞,以不同MOI值感染慢病毒,流式细胞术确定感染所需的最佳MOI值.感染慢病毒的神经干细胞经潮霉素筛选后进行单克隆培养,Western blot法检测NgR的沉默效率.取感染后不同天数的神经干细胞,实时定量PCR检测NgR沉默的稳定性.结果 神经干细胞分离培养6天后可见神经球形成;流式细胞术测定慢病毒感染的最佳MOI=10;慢病毒感染后NgR的沉默效率可达80％,并可在7 ～ 28天内维持在70％ ～ 80％.结论 慢病毒介导的shRNA可以在体外分离培养的大鼠神经干细胞内实现较为稳定的NgR基因沉默,为开展神经干细胞移植治疗脊髓损伤奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱悦	中国医科大学附属第一医院骨科	126	544	12.0	17.0
2	刘欣春	中国医科大学附属第一医院骨科	18	62	5.0	7.0