血管紧张素Ⅱ诱导的新生小鼠心肌细胞肥大模型

• 作者: 倪健 卞洲艳 周恒 唐其柱 袁园 邓伟
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌细胞 原代培养 血管紧张素Ⅱ 肥大 丝裂原活化蛋白激酶
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4695字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2015.11.008

摘要

目的 探索新生小鼠心肌细胞的原代培养方法,建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心肌细胞肥大模型.方法 使用0.03％的胰酶+0.04％的2型胶原酶多次消化分离心肌细胞,差时贴壁法纯化心肌细胞.1μmol/L AngⅡ刺激心肌细胞肥大,α-actinin染色进行心肌细胞纯度鉴定及面积检测,实时定量RT-PCR检测心肌细胞肥大标志物的表达,Western blot法检测蛋白质磷酸化水平.结果 培养得到的小鼠心肌细胞具有较高纯度及存活力;AngⅡ刺激后心肌细胞面积增大、蛋白合成增加,ANP、BNP、β-MHC等心肌细胞肥大标志物的mRNA表达水平较对照组明显升高(P＜0.05),而α-MHC表达则下降(P＜0.05);此外,AngⅡ刺激组ERK、JNK与p38的磷酸化水平较对照组明显上调(P＜0.05).结论 使用改良的新生小鼠心肌细胞原代培养方法,成功培养了具有较高纯度及存活力的小鼠心肌细胞,并建立了AngⅡ诱导的小鼠心肌细胞肥大模型.