乏氧与辐射联合诱导Smac过表达对A549细胞凋亡及细胞色素C和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3的影响

• 作者: 张斌 李长锋 王志成 金景鹏
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 辐射 乏氧 A549细胞 细胞色素C
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 胸心外科
• 页码范围: 1787-1789
• 页数: 3页
• 字数: 2450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.08.008

摘要

目的 利用乏氧与辐射联合诱导Smac过表达,探讨其对A549细胞凋亡的作用及相关分子机制.方法 氯化钴(CoCl2)乏氧,细胞经X射线照射后分别利用膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)试剂盒检测凋亡率,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测细胞色素C(Cyt C)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3 mRNA和Western blot检测相应蛋白的表达.实验分为正常对照组(Control)、pcDNA3.1-Egr-1-Smac(pE-Smac)组、pcDNA3.1-HRE/Egr-1-Smac (pH/E-Smac)组、2Gy、pE-Smac+2 Gy和pH/E-Smac+2 Gy组,按照常氧与乏氧处理.结果 与Control组比较,常氧处理后,2Gy、pE-Smac+2 Gy和pH/E-Smac+2 Gy组细胞凋亡率、CytC和Caspase-3 mRNA表达显著增加(P＜0.05),凋亡率增加到4.72、7.33和7.67倍,Cyt C和Caspase-3 mRNA表达分别增加到1.69、7.21、7.39倍和5.63、32.03、31.08倍;乏氧处理后,2 Gy、pE-Smac+2 Gy和pH/E-Smac+2 Gy组细胞凋亡率、Cyt C和Caspase-3 mRNA表达以及pH/E-Smac组凋亡率均显著增加(P＜0.05),凋亡率增加到1.76、2.54、2.89和5.83倍,Cyt C和Caspase-3mRNA表达增加到2.35、6.20、13.69倍和3.93、13.67、19.08倍.与常氧处理比较,乏氧各组(Control和pE-Smac组Cyt C mRNA表达除外)凋亡率、Cyt C和Caspase-3 mRNA均显著增加(P＜0.05).常氧与乏氧处理时,各组Caspase-3前体无明显变化,而2Gy、pE-Smac+2 Gy和pH/E-Smac+2 Gy组Cyt C和断裂Caspase-3表达增加,且乏氧较常氧处理的CytC和断裂的Caspase-3表达增加.结论 乏氧和辐射联合诱导的Smac过表达能诱导A549细胞凋亡率增加,其调控可能涉及到Cyt C→Caspase-3的分子机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金景鹏	吉林大学中日联谊医院内镜中心	20	77	6.0	8.0
2	张斌	吉林大学中日联谊医院内镜中心	113	706	14.0	21.0
3	王志成	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	64	216	8.0	11.0
4	李长锋	吉林大学中日联谊医院内镜中心	65	399	11.0	16.0