金黄色葡萄球菌腺苷酰转移酶耐药基因的克隆及其原核表达

• 作者: 周帅 周珍文 张咏莉 谢永强 陈吟霜 陈洪升
• 来源期刊: 中国实用医药
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 腺苷酰转移酶 耐药基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 281-282,283
• 页数: 3页
• 字数: 1416字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.12.196

摘要

目的：在大肠杆菌中克隆、表达金黄色葡萄球菌氨基糖苷类耐药基因：腺苷酰转移酶基因,为其功能研究奠定基础。方法按金黄色葡萄球菌腺苷酰转移酶蛋白编码序列设计引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增腺苷酰转移酶基因。将所得片段与pGEX-4t-1(+)载体连接,转化到感受态大肠杆菌BL21(DE3),提取质粒进行双酶切及测序鉴定, IPTG诱导重组蛋白表达, SDS-PAGE及Western-blot对重组蛋白进行鉴定。结果使用金黄色葡萄球菌基因组为模板,成功扩增约800 bp目的片段,重组质粒双酶切见目的片段,测序显示腺苷酰转移酶基因长783 bp,启始于ATG,终止于TAG,预测的等电点及分子量分别为7.75、28975.44,目的基因与Genbank金葡腺苷酰转移酶同源性为99%, SDS-PAGE及Western-blot显示在55 kD左右见重组蛋白表达。结论在大肠杆菌中成功克隆、表达了金黄色葡萄球菌腺苷酰转移酶基因,为其功能研究提供了物质基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张咏莉		39	254	9.0	14.0
3	周珍文		29	156	8.0	10.0
4	谢永强		29	142	7.0	10.0
5	周帅		4	4	1.0	2.0
6	陈洪升		5	27	2.0	5.0
7	陈吟霜		1	0	0.0	0.0