致白内障基因 Hsf4bK65R 位点突变对下游热休克蛋白表达的影响

• 作者: 娄强 崔秀坤 胡延忠 谢盼盼 马远方
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克因子4b 晶状体上皮细胞 热休克蛋白 点突变
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: ? 短篇论著?
• 页码范围: 1699-1703
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.09.030

摘要

目的：探讨致白内障基因热休克因子4b（Hsf4b） K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白（HSP）表达的影响。方法：采用KOD－Plus－Mutagenesis－Kit试剂盒构建pWZL－blast－HA－Hsf4b／K65R赖氨酸突变质粒；通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b／K65R突变质粒的细胞株；Western blotting 检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达；Western blotting 及real－timePCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果：阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL－blast－HA－Hsf4b／K65R构建成功。 K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达，但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论：pWZL－blast－HA－Hsf4b／K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。 Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马远方	河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室	121	553	13.0	16.0
2	娄强	河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室	13	14	2.0	3.0
3	谢盼盼	河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室	1	0	0.0	0.0
4	崔秀坤	河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室	2	1	1.0	1.0
5	胡延忠	河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室	6	8	2.0	2.0