VCP通过促进Huh7肝癌细胞P-IκB的降解激活NF-κB

• 作者: 刘钧 李天虚 焦伯延
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 含缬酪肽蛋白 NF-κB信号 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 分子诊断与基因检测
• 页码范围: 863-865,869
• 页数: 4页
• 分类号: R375.7
• 语种: 中文

摘要

目的 研究含缬酪肽蛋白(VCP)对肝癌细胞磷酸化核因子kappa B抑制蛋白(P-IκB)和核因子kappa B(NF-κB)信号的影响.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增VCP基因,并克隆于真核表达载体pCDNA3.1/myc-His(-)A,测序正确后将其转染Huh7肝癌细胞,转染30 h后裂解细胞,免疫印迹试验(Western blot)检测核因子kappa B抑制蛋白(IκB)、P-IκB的含量,萤火虫荧光素酶报告基因检测NF-κB的活性;并对VCP RNA干扰,检测对IκB、P-IκB的含量和NF-κB的活性的影响.结果 成功构建真核表达载体pCDNA3.1/myc-His(-)A-VCP,转染Huh7肝癌细胞后,IκB含量无明显变化,然而P-IκB含量明显降低,NF-κB信号活性显著增强;而对VCP RNA干扰后,NF-κB信号的活性受到明显抑制.结论 VCP通过促进Huh7肝癌细胞P-IκB的降解进而活化NF-κB,在肝癌的发生过程中发挥重要作用,是用于肝癌治疗的重要潜在靶点.