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摘要:
目的 探讨生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g(Gadd45g)过表达及靶向沉默对垂体瘤AtT-20细胞及小鼠原代星型胶质细胞的增殖、凋亡及自噬等影响.方法 构建 Gadd45g 基因的CDS区序列克隆至真核表达质粒 p3XFLAG-Gadd45g及其shRNA真核表达质粒pLKO .1-sh-Gadd45g ,将p3XFLAG-Gadd45g转染至小鼠垂体瘤AtT-20细胞中.其shRNA真核表达质粒pLKO .1-puro-sh-Gadd45g进行慢病毒包装,病毒感染小鼠星形胶质细胞;Western blot检测FLAG-Gadd45g融合蛋白的表达及RT-PCR检测shRNA沉默效率,CCK-8检测细胞增殖活力 ,Western blot检测其对凋亡蛋白、自噬蛋白的影响.结果 Gadd45g及其特异性shRNA真核表达质粒构建成功.构建的p3XFLAG-Gadd45g质粒在垂体瘤AtT-20细胞中能够表达;Gadd45g shRNA具有沉默效率.在垂体瘤AtT-20细胞中过表达Gadd45g ,可明显抑制细胞增殖 ,并能诱导Caspase-3表达,降低Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0 .05).与之相反,在原代培养的星形胶质细胞中,shRNA干扰Gadd45g表达,可促进细胞增殖,并降低Caspase-3表达,而增加Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0 .05).结论 垂体瘤中Gadd45g的表达缺失可能使得垂体瘤A t T-20细胞凋亡受阻及自噬作用增强 ,从而促进垂体瘤的发生、发展.恢复垂体瘤细胞中Gadd45g的表达及抑制垂体瘤细胞自噬作用有望成为垂体瘤治疗的新方法.
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文献信息
篇名 Gadd45g基因对垂体瘤AtT-20细胞的增殖、凋亡和自噬的影响
来源期刊 江苏医药 学科 医学
关键词 生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g 垂体瘤
年,卷(期) 2015,(10) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 1130-1134
页数 5页 分类号 R739
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 龚爱华 江苏大学医学院 77 261 10.0 13.0
2 杨勇 江苏大学附属人民医院神经外科 24 132 7.0 11.0
3 陈波 江苏大学附属人民医院神经外科 35 109 6.0 9.0
4 葛璐 江苏大学医学院 8 41 4.0 6.0
5 张锋 江苏大学附属人民医院神经外科 9 53 4.0 7.0
6 胡维 江苏大学医学院 3 11 2.0 3.0
7 胡昌龙 江苏大学附属人民医院神经外科 4 4 1.0 2.0
8 王景文 江苏大学附属人民医院神经外科 4 8 1.0 2.0
9 王安利 江苏大学医学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
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生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g
垂体瘤
研究起点
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江苏医药
半月刊
0253-3685
32-1221/R
大16开
南京市广州路300号
28-4
1975
chi
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18786
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59869
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