兔源多杀性巴氏杆菌C51-17株ompA基因表达与免疫原性鉴定

• 作者: 仇汝龙 刘星 宋艳华 徐为中 王芳 胡波 范志宇 薛家宾 魏后军
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 兔多杀性巴氏杆菌 ompA 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（35）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 227-228,237
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2725字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究兔源多杀性巴氏杆菌C51-17株ompA基因表达与蛋白免疫原性鉴定.[方法]根据GenBank公布的多杀性巴氏杆菌序列AE004439设计引物,经PCR扩增出兔源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompA基因,开放阅读框包含l 062 bp碱基,插入到pGEX-6p-1质粒,构建成功重组表达载体pGEX-dompA,转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导高效表达出多杀性巴氏杆菌成熟重组外膜蛋白ompA.[结果]表达产物经SDS-PAGE分析,重组多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompA分子量在63 ku,Western blot分析显示,重组蛋白能与兔抗多杀性巴氏杆菌高免血清呈现免疫反应,表明表达的重组蛋白具有较好的免疫活性.[结论]获得的重组蛋白为家兔多杀性巴氏杆菌病诊断试剂盒和疫苗的进一步研究奠定基础.