兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OMPH1基因的克隆及原核表达

• 作者: 孟轲音 王开 裴志花 马红霞 高云航
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 兔多杀性巴氏杆菌 OMPH1基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 15-17,21
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61+2
• 语种: 中文

摘要

本试验旨在克隆和表达兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OMPH1基因,并对其表达产物的反应原性进行研究.以兔多杀性巴氏杆菌C51-2-499株总DNA为模板,进行外膜蛋白基因OMPH1的PCR扩增,得到了1条大小为1 041 bp的基因片段,克隆至pMD-18T中.测序分析证明,它与国内外报道的多杀性巴氏杆菌OMPH1基因的核苷酸序列相似性达99％以上.将该基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,经酶切和测序分析表明,重组表达载体pET-30a(+)-OMPH1构建成功.将此重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导.SDS-PAGE检测结果证实,该基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式得到表达,表达产物的分子质量约47KD,与预期的结果一致.Western-blot分析表明,OMPH1重组表达蛋白具有反应原性,可被兔多杀性巴士杆菌阳性血清识别,为兔多杀性巴氏杆菌基因重组疫苗及新型诊断试剂的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高云航	吉林农业大学动物科学技术学院	139	634	14.0	18.0
2	马红霞	吉林农业大学动物科学技术学院	149	619	13.0	17.0
3	王开	吉林农业大学动物科学技术学院	85	210	7.0	10.0
4	裴志花	吉林农业大学动物科学技术学院	63	143	6.0	9.0
5	孟轲音	军事医学科学院军事兽医研究所	15	64	4.0	7.0