牛型布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因的克隆与原核表达

• 作者: 左玉柱 张占霞 王增利 郑丽丽
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: bp26基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 91-95
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1573.2011.06.019

摘要

根据GenBank中登录的牛型布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因序列,设计了1对引物,采用PCR技术,牛流产病例分泌物为模板,扩增bp26的编码基因,得到1条753 bp的片段.将其连入Simple-T载体中进行酶切和测序鉴定.测序正确后,将该基因插入到pET-28a(+)载体中构建原核表达载体,将此重组质粒转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中,并用IPTG诱导,将诱导产物用SDS-PAGE和Western-blot检测.结果显示bp26基因可以在大肠杆菌中获得表达,表达产物分子质量约为29 ku,与预计的蛋白分子质量一致.Western-blot试验证明,该蛋白可以与患牛布氏杆菌的阳性血清产生特异性结合反应,具有良好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左玉柱	河北农业大学动物科技学院	86	419	10.0	17.0
2	王增利		16	63	6.0	7.0
3	郑丽丽		13	38	4.0	5.0