布鲁氏菌BP26蛋白的原核表达及鉴定

• 作者: 侯力嘉 吴胜昔 曾政 李令臣 李俊萱 鲁友铭 黄恒
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 布鲁氏菌 BP26重组蛋白 原核表达 镍柱纯化 蛋白免疫印迹
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 药学·生物工程
• 页码范围: 185-190
• 页数: 6页
• 分类号: R516
• 字数: 3410字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2019.10.029

摘要

为了实现布鲁氏菌BP26蛋白在原核宿主细胞进行高效表达,对布鲁氏菌BP26基因进行密码子优化,化学合成了BP26全基因,并将其克隆至pET30a(+)载体上,构建重组质粒pET30a(+)-bp26,转化至基因工程菌BL21(DE3),利用IPTG进行诱导表达.利用His-tag镍柱纯化BP26重组蛋白,并对纯化后的重组蛋白进行鉴定.结果 显示:重组质粒经Nde I与XholI双酶切,酶切产物通过琼脂糖凝胶电泳显示与目的产物条带大小一致;当诱导条件为IPTG浓度1 mmol/L,37℃诱导8h时,重组蛋白的表达量最高;纯化后的目的蛋白经过Western Blot鉴定,显示在27.8 kD左右有一条明显的蛋白印迹条带,与预期大小相符.本研究成功实现了在大肠杆菌高效表达BP26蛋白,为后续布病检测新试剂的研制及疫苗的研发奠定了生物学基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄恒		25	26	3.0	3.0
2	曾政		48	178	8.0	11.0
3	吴胜昔	重庆理工大学药学与生物工程学院	22	38	3.0	4.0
4	鲁友铭	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	0	0.0	0.0
6	侯力嘉	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	0	0.0	0.0
7	李令臣	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	3	1.0	1.0
8	李俊萱	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	3	1.0	1.0