miR-124对Müller细胞转分化机制的影响

• 作者: 吕立夏 张介平 徐国彤 王娟 范文斌
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-124 STAT3 Müller细胞 转分化
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-6
• 分类号: R774.1
• 字数: 3931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16118/j.1008-0392.2016.01.001

摘要

目的 探讨过表达miR-124对Müller细胞转分化机制的影响.方法 构建pSuper-EGFP-miR-124质粒并测序验证,获得miR-124的过表达载体.并用其转染Müller细胞系,用G-418进行筛选,获得Müller细胞稳转株,将样本送基因芯片检测.利用TargetScan和miRBase Targets数据库预测差异表达明显的miR-124靶基因,通过Real-Time PCR和荧光素酶活性测定实验验证分析miR-124的靶基因,筛选变化比较显著的基因进一步研究.miR-124转染Müller细胞,提取mRNA和蛋白,采用Real-Time PCR、Western印迹法检测相关基因的变化.结果 成功构建pSuper-EGFP-miR-124质粒并获得了稳定转染的Müller细胞系.荧光素酶报告分析表明,miR-124与STAT3 3'UTR相互作用.体外结果显示,pSuper-miR124转染Müller细胞后,STAT3表达下降并开始表达光感受器细胞标志物CRX和RCVRN.结论 miR-124可能通过下调STAT3,上调CRX和RECVN,诱导Müller细胞向感光细胞转分化.