大豆氨基酸透性酶基因GmAAP2-like 1的克隆及功能初探

• 作者: 夏铜梅 李美美 梅圆圆 王丹 王宁宁
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 大豆 氨基酸透性酶 缺氮 融合PCR 氨基酸运输
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 19-25
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

氨基酸透性酶(amino acid permeases)在植物不同器官的氨基酸转运过程中发挥着重要作用，但迄今为止，大豆中氨基酸透性酶相关的研究甚少。本文利用大豆初生叶水培系统对大豆(Glycine max)品种‘Williams 82’进行缺氮处理后，发现与足氮对照相比，大豆初生叶中GmAAP2-like 1基因的表达明显上调。对大豆不同器官中GmAAP2-like 1的转录水平进行RT-PCR检测，结果显示该基因在花、叶和茎中的表达量较高而在根和种子中表达量很低。构建GmAAP2-like 1(无内含子)过表达植物表达载体，在转化农杆菌时发现，该载体转化农杆菌GV3101致死；改进载体构建策略，采用融合PCR方法，在GmAAP2-like 1的第一个外显子后插入一段内含子序列，改进的载体可以成功转化农杆菌。应用农杆菌介导的花苞浸泡法转化拟南芥，对所获得的转基因拟南芥抗性苗进行基因组PCR和RT-PCR鉴定，共检测到8个GmAAP2-like 1不同程度表达的转基因拟南芥株系，且其中的内含子都得到了正确的剪切。氨基酸有毒类似物(MSX)处理实验表明：转基因拟南芥对MSX处理比野生型更为敏感，暗示GmAAP2-like 1具有运输谷氨酸等酸性氨基酸的功能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁宁		45	711	14.0	26.0
2	王丹		28	214	7.0	14.0
3	梅圆圆		8	0	0.0	0.0
4	夏铜梅		2	0	0.0	0.0
5	李美美		2	0	0.0	0.0