沉默Prohibitin基因对人结直肠癌细胞株HCT116增殖和凋亡的影响

• 作者: 张熙 洪成业 王青兰 程艳洁 陈德波
• 来源期刊: 福建医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Prohibitin siRNA HCT116 细胞增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8,61,封3
• 页数: 6页
• 分类号: R735.3+7
• 字数: 3525字
• 语种: 中文

摘要

目的 siRNA介导抗增殖蛋白Prohibitin (PHB)基因沉默对人结直肠癌细胞株HCT116增殖和凋亡的影响.方法 通过脂质体LipofectamineTM 2000在HCT116细胞中转染PHB-siRNA,以Western blot来筛选siRNA片段.设立阴性对照NC组和高效沉默PHB138,PHB539 siRNA片段为实验组,重新转染HCT116,通过平板克隆形成实验、CCK-8检测细胞增殖能力;Annexin Ⅴ-FITC细胞凋亡试剂流式细胞术、Caspase-3/ Caspase-9活性检测等方法检测细胞凋亡;Annexin Ⅴ-FITC和Hoechst染色荧光显微镜观察.结果 Western blot结果显示siRNA片段PHB138、PHB539能明显抑制PHB蛋白表达;转染后HCT 116平板克隆形成率分别PHB138 (31.1±4.0)％、PHB539 (12.4±1.2)％、NC (43.4±2.1)％,差异有统计学意义(P＜0.001);CCK8实验发现转染后1～5 d,实验组与对照组比较,细胞增殖未收到显著影响(P＞0.05).在转染第7天,PHB539 siRNA能显著抑制细胞增殖(P＜0.01);Caspase-3活性度为PHB138 (1.50±0.39)、PHB539 (1.81±0.41),Caspase-9活性度PHB138(2.02±0.43)、PHB539 (2.81±0.51),差异有统计学意义(P＜0.05);Annexin Ⅴ-FITC和Hoechst染色均在荧光显微镜下观测有明显的凋亡现象,且凋亡比例和强度比阴性对照强.结论 靶向PHB-siRNA干扰可以有效地沉默结直肠癌细胞HCT116 PHB基因,下调PHB蛋白水平,从而抑制结直肠癌细胞HCT116增殖、促进凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈德波	福建医科大学附属泉州第一医院普外科	20	54	5.0	6.0
2	程艳洁	福建医科大学附属南平市第一医院消化内科	4	27	2.0	4.0
3	洪成业	福建医科大学附属泉州第一医院普外科	9	7	1.0	2.0
4	王青兰	福建医科大学附属泉州第一医院普外科	15	28	3.0	5.0
5	张熙	福建医科大学附属泉州第一医院普外科	5	6	1.0	2.0